植物的茎尖培养脱毒技术11页PPT

发布于:2021-09-25 20:29:26

植物的茎尖培养脱毒技术 植物茎尖脱毒技术利用植物茎尖组织培养, 结合血清病毒检测技术,在防蚜传毒条件下,将影 响植物正常生长的植物病毒脱除的高新农业生物技 术。茎尖脱毒主要包括表面灭菌、茎尖剥离、茎尖 培养等步骤。 原理及依据 ? 病毒在植物体内分布不均,茎尖处含量最少 ? 在一个植物体内,病毒易于通过维管系统而移动,但在分生组织 中不存在维管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞间连丝,速度 很慢,难以赶上活跃生长的茎尖; ? 在旺盛分裂的分生细胞中,代谢活性高,竞争抑制了病毒的复制; ? 在茎尖存在高水*内源生长素,也可能抑制病毒的增殖。 主要方法步骤 ? (1)茎尖的剥离:此步是技术关键,一般在解剖镜下操作。2-3cm的 茎段,剥去大叶,水冲洗1h左右,酒精快速消毒,无菌条件下5%漂白 粉溶液(或其他消毒剂)消毒7-10min,无菌水清洗,解剖镜下剥取茎 尖。 ? (2)切取茎尖的大小虽然切取茎尖越小,带有病毒的可能性就越小, 但组织培养中,切取的茎尖太小,则不易成活。不同种类的植物和不同 病毒,切取的最适茎尖大小也不同。 ? (3)组织培养常用基本培养基是MS培养基,它有较高浓度的无机盐, 对促进组织分化和愈伤组织生长有利;植物生长调节的种类和配比依培 养种类和生长时期来调整。 酒精擦拭手 外植体消毒 浸泡5-7min 器械消毒 酒精灯灼烧 酒精擦拭培养皿 酒精擦拭 旋转灼烧 显微镜下 获取茎尖 接种 盖好瓶塞 几种方法的配合使用是提高植物脱毒效果: ? (1) 高温热处理与微茎尖脱毒培养技术 ? (2) 高温热处理与微(体)茎尖嫁接培养技术 ? (3) 化学处理与茎尖脱毒培养技术 香石竹脱毒的具体操作过和如下: (1)热处理 将盆栽植株或离体瓶苗,在36~38℃下处理2周,或每天 在36℃16小时和38℃8小时处理共30天,光照为3000lx。 (2)表面消(毒1)选热取处理盆栽将香盆栽石植竹株植或株离体叶瓶腋苗间,生在出36~的3侧8℃芽下为处理外2植体,先用 自来水冲洗半周小,时或每,天用在7356℃%1的6小酒时精和消38℃毒83小0时秒处,理再共3用0天2,.5光%照次为氯酸钙或次氯 酸钠溶液处理301050l分x。钟,取出后用无菌蒸馏水清洗4次,用无菌滤纸吸去多余 水分备用。 (3)茎尖剥离 在双筒解剖镜下。切除叶片使芽体暴露,用解剖针剥掉 幼叶,直到只剩下2个最幼小的叶原基。 (4)茎尖培养 用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃,光照 16小时,光照强度为2000lx,*均两周进行一次转接,5~7周可获得单 个小植株。 植物的茎尖培养脱毒技术优缺点: ? 茎尖生长点的培养成了去除植物病毒,使植物复 壮的重要方法。茎尖培养还可以去除其他病原体, 如细菌、真菌等。 ? 茎尖越小,去病毒机会越大,脱毒效果就越好, 但同时因为其含营养及水量太低,故培养时对培 养基的要求就越高,对剥离技术要求也越高。 植物的茎尖培养脱毒技术应用 ? 茎尖脱毒培养对植物病毒的脱除效果好,后代遗 传性稳定,是目前生产上最常用的脱毒措施,已 在马铃薯、花卉、水果、蔬菜等作物脱毒快繁上 得到了广泛应用。

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